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细胞的体外培养检测产品生物性能
点击次数:1463 发布时间:2013-08-15

1.实验目的:

通过细胞的体外培养来检测产品的生物性能是否达到要求。

2.实验原理:

体外培养的细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或l:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养。通过贴壁细胞的传代培养,观察细胞的生长状态可以反映出培养产品是否达到细胞培养的要求。

3.实验材料:

3.1 抽检样品:

3.2 细胞株:VERO细胞系:完全贴壁细胞,主要用于接种病毒的一种细胞。

3.3 实验试剂:RPMI1640(8111031)、0.25%胰酶(876536)、小牛血清(8187648)、都购自广州英韦创津生物试剂公司。

3.4 实验耗材:3ml的巴斯德吸管、酒精灯、镊子、酒精棉球。

3.5 实验仪器:XDS-1倒置显微镜购自广州粤显光学仪器科技有限公司;

超净工作台购自苏州净化仪器设备公司;

4.实验步骤:

4.1. 在倒置显微镜下观察细胞形态和密度,取生长良好的细胞若干瓶,弃掉旧培养液。

4.2. 加入胰酶消化细胞,消化适度后倒去胰酶。

4.3. 加入适量培养液反复吹打数次。

4.4. 细胞计数稀释细胞密度为1×105/ml

4.5. 将细胞接种于抽检样品中:

5.实验结果:

1、Vero细胞培养24小时后10×10倍下图片

2、Vero细胞培养48小时后10×10倍下图片

3、细胞计数

6.结果判定

这次抽检样品做细胞培养检测,细胞生长状态正常,贴壁生长良好,10%血清培养液培养,细胞增长率符合企业标准。

 
 

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