欢迎光临广州洁特生物过滤股份有限公司网站!
销售咨询热线:
15812423656

产品目录

Product Category
您的位置: 网站首页 > 技术文章 > 如何利用细胞培养瓶进行细胞传代操作?

如何利用细胞培养瓶进行细胞传代操作?

发布日期: 2022-10-08
浏览人气: 566
  细胞传代是指需要将分割成小的部分,重新接种到另外的培养容器内,再进行培养的过程。细胞培养瓶是细胞通过过程中的一种常见消耗品。那么这个具体步骤是什么?
  
  1、从培养箱中取出细胞培养瓶,用酒精喷壶在瓶身表面喷洒75%的酒精进行消毒,然后转移到超净台上。
  
  2、打开盖子,轻轻吸出旧的培养液,用巴氏吸管加入适量的PBS缓冲液清洗1-2次,然后丢弃PBS缓冲液。
 
  

细胞培养瓶
 

 

  3、用吸管加入1-2毫升胰蛋白酶,并以"十字"方式摇动,使胰蛋白酶充分接触细胞。
  
  4、将装有胰蛋白酶的细胞培养瓶转移到倒置的显微镜平台上,在显微镜下观察细胞的消化情况。当细胞变圆并大量脱落时,准备停止消化,用75%的酒精喷洒瓶子表面,然后转移到超净台。
  
  5、用吸管(或巴氏吸管)加入等量的含血清培养基,终止消化。吸管充分吹气,使细胞*脱落。
  
  6、将瓶中的混合液体转移到离心管中,平衡并离心约5分钟。
  
  7、离心后,用酒精喷壶喷洒离心管表面,转移到超净台上,打开盖子,将上清液倒入废液槽。
  
  8、加入适量的含血清的培养基,用吸管吸管轻轻吹打,使细胞悬浮。
  
  9、将细胞悬液分成2个(或更多)清洁消毒的培养瓶,加入适量的培养基,并加盖。
  
  10、将分装好的细胞培养瓶放在倒置的显微镜台上,观察细胞。细胞的数量应该得到保证。细胞太少会影响生长。
  
  11、在瓶子上做标记,注明通过时间、细胞类型、操作者和其他信息。放入培养箱前,再次用酒精喷洒瓶体表面,整理操作平台,用75%酒精擦拭超净台面,清理废液和垃圾。
  
  细胞培养瓶操作时注意穿戴消毒服、手套和口罩,全程注意无菌操作,避免细胞污染。
分享到:
扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站